El objetivo de la desinfección es eliminar el riesgo de infectividad de un material o superficie.
Dependiendo del material a tratar y la evaluación costo – beneficio, utilizaremos un método apropiado de desinfección o esterilización.
Teniendo en cuenta la capacidad del agente para destruir microorganismos o reducirlos, se clasifican en distintos niveles:
-Bajo: Reduce microorganismos, no el Bacilo de Koch, ni formas esporuladas, ni virus no lipídicos. Posee poca efectividad frente a hongos. Generalmente son de uso antiséptico.
-Intermedio: Elimina bacterias vegetativas, mata al Bacilo de Koch (tuberculicida), algunas esporas bacterianas, hongos y virus. Ej. : fenoles, hipoclorito de sodio.
-Alto: Elimina todos los microorganismos incluyendo esporas, hongos y virus. Ej. : glutaraldheido, ácido peracético.
CLASIFICACIÓN
MÉTODOS FÍSICOS
-CALOR
La desinfección por calor recibe el nombre de Pasteurización. Este proceso, por calentamiento de líquidos se emplea generalmente a temperaturas por debajo del punto de ebullición.
Destruye microorganismos patógenos (infecciosos); no incluye esporas.
La temperatura alcanzada es de 65°C durante 15 minutos.
Las condiciones para obtener óptimos resultados son:
-los elementos deben estar limpios
-inmersión completa de los mismos en agua, alcanzando la temperatura adecuada, o usar Autoclave de vapor
-los elementos deben ser secados posteriormente
-RADIACIÓN UV
Estas radiaciones poseen un bajo poder de penetración, se emplea para disminuir la carga microbiana de superficies. No se considera un método esterilizante.
Mecanismo de acción: máximo de absorción de los ácidos nucleicos es a 265 nm. La luz UV provoca dímeros de pirimidina en el DNA y si no se reparan, la célula muere.
-LIMPIEZA
Reduce la contaminación y evita que se depositen sustancias pirógenas en los distintos materiales. Este proceso puede ser:
-Manual
Esta expulsa mecánicamente una alta proporción de microorganismos presentes en el material.
El lavado y fregado con agua a temperatura adecuada y detergente permite que no se disemine el polvo que puede trasladarse a superficies críticas.
No se debe usar el agua a más de 45°C, porque coagula la albúmina y se hace más difícil la limpieza.
No usamos escobas, plumeros ni franelas ya que crean un riesgo de infección por diseminación.
El personal debe proteger su salud utilizando guantes resistentes, protección ocular y delantal impermeable y barbijo.
Las desventajas
– Requiere mucho tiempo y personal entrenado.
– No remueve la suciedad de zonas inaccesibles.
– Disemina microorganismos por aerosoles, al cepillar.
-Mecánica
Existen maquinas lavadoras especialmente diseñadas para el lavado de material. El proceso se realiza a través de una cinta transportadora, que incluye el lavado con agua fría, lavado con agua caliente, enjuague y secado. Estas maquinas forman chorros de agua y vapor que trabajan por fricción y generan turbulencias.
-Ultrasónica
Se utiliza energía en forma de onda ultrasónica 20 Khz. transductor metálico por 5 minutos o onda ultrasónica de 35 Khz. transductor de cristal por 3 minutos. Esta limpieza no remueve material incrustado, pero es suplementaria de la manual. Esta onda no produce muerte microbiana.
No se utiliza en materiales de goma, PVC, metal y plástico al mismo tiempo.
MÉTODOS QUÍMICOS
Generalmente son agentes líquidos que actúan bloqueando una función celular del microorganismo produciéndole la muerte (actúan en pared celular o membrana, grupo enzimático o proteínas).
Algunos agentes actúan también como esterilizantes.
-ALDHEIDOS. Alto nivel
Son agentes alquilantes: actúan sobre enzimas celulares incorporando un grupo alquilo por uno amino.
Actividad microbicida, esporicida, viricida y funguicida.
–Ejemplos de los más utilizados:
- GLUTARALDHEIDO: Acción desinfectante y esterilizante.
Amplio espectro con rapidez de acción. Actúa contra Mycobacterium tuberculosis y en presencia de materia orgánica.
Se presenta como líquido viscoso e incoloro.
Forma de uso: solución al 2% en pH alcalino (7 a 9); ya preparado es estable durante aproximadamente 15 días si está en recipientes tapados.
Se utiliza para esterilizar materiales sensibles al calor. Es el único esterilizante efectivo en frío (a un pH entre 7 y 9 actúa sobre esporas).
Tiempo contacto:
– 45 minutos a 25°C para gérmenes patógenos y vegetativos incluyendo Pseudomona aeroginosa,
– 10 minutos a 20°C para hepatitis,
– 10 horas para esporas incluyendo “bacillus subtilis”.
Importante: cuando se lo usa para esterilizar instrumental, no se deben mezclar instrumentos de acero con los de aluminio ya que reaccionan entre sí. No daña goma, ni plásticos.
Precauciones: Los gases de su evaporación son nocivos; producen irritación en ojos, piel y obstrucción nasal, catarro e irritación de todo el tracto respiratorio. Alopecia.
Por lo tanto debe utilizarse en habitaciones ventiladas y lavar con posterioridad los instrumentos con agua estéril, para eliminar residuos de la solución.
- FORMALDEHÍDO: Acción Desinfectante.
Bactericida, tuberculicida, viricida. Acción moderada en esporas.
Forma de uso: Disolución acuosa al 10% – forma liquida. En forma de gas es esterilizante.
El formaldehído gaseoso se obtiene por calentamiento del paraformaldehído (OH (CH2O)n-H), lo que produce la despolimerización de este compuesto y la liberación de formaldehído.
La solución acuosa al 41% se denomina formalina; se comercializa en forma cristalina sólida con 95% de formaldehído que se libera al calentarse. Los vapores de formol, tienden a condensarse sobre la superficie.
Las pastillas de formalina a temperatura ambiente obtienen la esterilización en 367 horas de exposición.
A temperatura ambiente es un desinfectante de superficies. A 80°C aumenta su penetración, esterilizando objetos inanimados. Con una humedad adecuada esteriliza ambientes. Actúa en presencia de materia orgánica; demora de 6 a 12 hs. para eliminar bacterias y de 2 a 4 días para esporas.
Precauciones: Su evaporación es nociva ya que los gases son irritantes para las mucosas, ojos, piel y obstrucción nasal, causan catarro e irritación general del tracto respiratorio. Exposición limite para el personal: 1ppm por 8 horas de trabajo.
-PEROXIDO DE HIDRÓGENO: Alto nivel
Agente oxidante: actúa por la producción de radicales libres de OH que ataca los lípidos de la membrana y ADN.
Fórmula H2O2 (agua oxigenada). Fuerte acción germicida especialmente sobre microorganismos anaeróbicos.
Forma de uso: Actúa por inmersión en solución al 6% durante 10 minutos.
Uso Antiséptico. Comercialmente se encuentra en concentración del 30% de peroxido de hidrógeno (equivale a 100 Vol. de O2).
-ÁCIDO PERACÉTICO
Agente oxidante. Desinfectante de amplio espectro (esporicida, viricida).
Eficaz a bajas temperaturas, aún en contacto con materia orgánica.
No afecta al aluminio, acero ni plástico. No sirve para desinfectar objetos de goma. No deja residuos. Es soluble en agua y alcohol.
Forma de uso: al 0.2% a 50° C a los 12 minutos elimina organismos vegetativos. Al 0.35% y temperatura ambiente es esporicida, cumpliendo una función esterilizadora.
Precauciones: se trabaja en equipos costosos, por su alta toxicidad.
-DERIVADOS FENÓLICOS: Nivel intermedio
Son desinfectantes que provocan lesiones en la membrana citoplasmática ya que desordenan la disposición de las proteínas y fosfolípidos. Esto causa filtración de compuestos celulares, inactivación de enzimas y lisis.
El fenol no es usado a menudo como desinfectante por su olor desagradable, por ser muy irritante y por el residuo que queda luego de tratar las superficies. Los derivados del fenol más utilizados son el hexaclorofeno (compuesto difenílico) y los cresoles (alquil fenoles).
Estos son muy efectivos a bajas concentraciones (1%) contra formas vegetativas de bacterias, bacilo tuberculosis y hongos.
No son efectivos contra esporas y virus.
Reduce su acción en presencia de sustancias orgánicas y de sales.
– Derivados alquílicos: si aumenta la cadena alquílica aumenta la actividad desinfectante.
– Derivados halógenos: según la ubicación halógena en la cadena, aumentara su actividad.
– Derivados ácido hidroxibenzoico: acción microbioestático. Ej. : ac. Salicílico.
Forma de uso:
–Como desinfectante
• Desinfección hospitalaria de nivel intermedio: orto-fenilfenol y orto-bencil-para-clorofenol. En áreas semicríticas y no críticas (laboratorios, suelos, paredes) e instrumentos médicos no críticos (por inmersión). No debe utilizarse para objetos semicríticos que entren en contacto con mucosas o piel no intacta.
• Desinfectante de material de desecho bacteriológico: tricresol en solución al 5% como desinfectante de excrementos.
–Como antiséptico
• Antisepsia quirúrgica de manos: hexaclorofeno al 3% en solución jabonosa, cloroxilenol Ej. : espadol. Con 2 minutos de acción sobre la piel con cepillo, en el lavado, se logra una acción mecánica que ayuda a la eliminación de microorganismos.
• Antisepsia de la piel: tricresol
Precauciones:
– Soluciones en concentraciones superiores al 5% se clasifican como tóxicas.
– Sustancia de olor desagradable, irritable, tóxico sobre tejidos.
– Las soluciones de fenol y sus derivados deben conservarse en envases cerrados y protegidos de la luz, ya que oscurecen gradualmente tras exposición a la luz y al aire.
– No debe aplicarse a mucosas, heridas abiertas o quemaduras, ya que su absorción a través de la piel y mucosas es elevada y podría absorberse una cantidad suficiente para originar síntomas tóxicos.
– El fenol es absorbido por la goma y por materiales porosos, y puede ser inactivado por algunos plásticos.
-CLORO: Agente halógeno. Nivel intermedio.
Se debe conocer el % de cloro disponible que nos indica la acción germicida.
Actúa sobre bacterias Gram + y -, en esporas con mayor cc de producto pH 7-9, hongos y virus. Tuberculicida.
Forma de uso: con pH alcalino (8) y temperatura menor a 50° C logramos una solución más estable. Las soluciones deben preparase diariamente.
Se utiliza en diluciones del 0.05%, equivale a 500 ppm eliminando bacterias, virus y hongos; y del 0.10 % igual a 1000 ppm elimina también mycobacterias.
El material no debe tener restos de materia orgánica ya que consumen el cloro disponible.
Tanto el gaseoso como el hipoclorito en contacto con el agua de hidrolizan formando ácido hipocloroso responsable de la acción microbiana.
Presentaciones comerciales en 40 gr./L a 90 gr./L.
Precauciones: en estado gaseoso es corrosivo y de difícil manejo. Irritante de mucosas y aparato respiratorio. Decolorante.
–COMPUESTOS DE AMONIO CUATERNARIO: Bajo nivel
Este agente actúa sobre la membrana celular, desorganizando sus funciones y haciéndola permeable por desnaturalización de proteínas.
Posee acción tensioactiva, permite la atracción de moléculas, por “adsorción” por un grupo polar hidrófilo balanceado con un grupo hidrófobo, generando un buen agente de limpieza.
Posee un amplio espectro de acción. No actúa sobre esporas bacterianas y es baja su actividad contra virus.
Su actividad disminuye en presencia de sustancias orgánicas, por reacción de adsorción.
Uso particularmente en superficies.
– Cloruro de benzalconio: tiempo mínimo de contacto: 5 min. Es soluble en agua y alcohol, y más estable en pH alcalino. No es tóxico.
– Tego 51: se ioniza en soluciones acuosas, anfolitico. Actúa sobre bacterias gram + y -, no sobre virus. Posee baja toxicidad. No es corrosivo.
Concentración de uso: del 1% por 10 minutos.
–BIGUANIDOS
Actúa sobre la membrana celular.
Posee acción germicida. Es una molécula con grupos hidrófilos e hidrófobos alternados que producen agentes tensioactivos contra S.Aereus, E.Coli, M.Tuberulosis. No actúa contra esporas.
Ej. : Clorhexidina. Compuesto cationico, incompatible con aniónicos (jabones, detergentes)
Son de uso antiséptico. La sangre no interfiere en este caso. Muy útil en el lavado preoperatorio de manos y piel. Acción rápida.
Lavado quirúrgico de manos:
• Humedezca las manos y antebrazos con agua.
• Aplique 5 ml de Clorhexidina y frote durante 3 minutos.
• Humedezca un cepillo con Clorhexidina y frote prestando particular atención a las
uñas, cutículas y los espacios interdigitales, por dos minutos.
• Enjuague con abundante agua.
• Seque sus manos cuidadosamente con una toalla estéril.
Lavado clínico de manos:
• Humedezca las manos con agua.
• Aplique 5 ml de Clorhexidina en las manos.
• Lave por 1 minuto.
• Enjuague bien y seque cuidadosamente.
Precauciones: Sustancia fotosensible no debe almacenarse en envases transparentes.
Puede causar dermatitis por contacto, reacciones anafilácticas, conjuntivitis.
–ALCOHOLES
Actúan desnaturalizando proteínas.
La acción germicida aumenta según su peso molecular: Butanol > Propanol > Etanol > Metanol.
Tiene uso antiséptico y desinfectante, a concentraciones de 95° y 60 °
Activo sobre bacterias Gram + y -, virus lipofilicos; los virus hidrofilicos son más resistentes. No actúa contra esporas.
Alcohol isopropílico: posee acción germicida superior al etanol por disminución de la tensión superficial de la célula bacteriana.
– Alcohol 70% en S. Aereus: 15 segundos muere.
– Alcohol 70% en E. Coli: 10 segundos muere
– El Alcohol al 100% no es efectivo, hay que hidratarlo.
Precauciones: no activo en presencia de materia orgánica. Irritante para vías respiratorias, piel, mucosas y ojos. No usar en lesiones abiertas.
I M P O R T A N T E
-Usar un solo desinfectante a la vez.
-Las soluciones deben hacerse en recipientes limpios.
-Los envases casi vacíos no deben rellenarse.
-No mezclar desinfectantes – salvo que uno sea alcohol.
-No mezclar desinfectantes con detergentes.
-Vigilar y controlar la fecha de vencimiento de cada producto antiséptico o desinfectante.
FACTORES QUE INTERFIEREN EN EL USO
Estos se deben tener en cuenta a la hora de elegir que desinfectante usar.
-Tiempo de contacto. Actúan por reacciones químicas, donde la velocidad de reacción es proporcional al número de bacterias sobrevivientes por unidad de volumen. La muerte no es instantánea en ningún microorganismo por lo que se debe conocer el tiempo de acción. Es indispensable reducir la carga microbiana inicial para asegurar su eficacia.
–Forma de aplicación. Puede ser por pulverización, inmersión o contacto con la superficie.
–Concentración. No se debe modificar la establecida para cada procedimiento.
–Temperatura. Aumenta la velocidad de muerte al incrementar la misma. Varía según cada producto y materia presente en la superficie a tratar.
–pH. La acidez como la alcalinidad son perjudiciales. Cada desinfectante tiene su pH óptimo de acción.
–Estabilidad. Luego de la dilución la solución sufre alteraciones. Se recomienda utilizar soluciones recién preparadas ya que las mismas se pueden contaminar o perder sus propiedades. Todos los envases deben permanecer tapados después de cada uso.
–Estabilidad microbiana. Se dice cuando un microorganismo no se destruye con un desinfectante en su concentración de uso o frente a otro microorganismo de igual o diferente especie. Esto sucede por intercambio de información genética; por tiempo inadecuado de exposición; por presencia de sustancia orgánica.
–Influencia de sustancias.
Las sustancias orgánicas (comida, grasas, sangre, orina) interfieren negativamente en el proceso, protegiendo a los microorganismos:
– formando barreras impidiendo el contacto con el desinfectante
– formando componentes inertes por precipitación o reducción
Las sales de las aguas duras disminuyen el efecto antimicrobiano de los Amonios cuaternarios.
El alcohol formando parte de un desinfectante aumenta el efecto antimicrobiano.
En el uso de Antisépticos tener en cuenta las alergias del paciente.
En aplicaciones en altas concentraciones se debe considerar el grado de absorción del mismo.
VALIDACIÓN DE LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN
Los programas de limpieza y desinfección son esenciales para mantener las áreas de trabajo dentro de las especificaciones exigidas por la Organización Mundial de la Salud (OMS).
Es por esto que un punto fundamental del trabajo del Técnico para Bioterio es contar con la validación de los desinfectantes utilizados, por medio de la evaluación de la actividad biocida de los desinfectantes que tiene como principio activo glutaraldehido, hipoclorito de sodio, amonios cuaternarios.
Las diluciones de trabajo son las recomendadas por los fabricantes y se ensayan frente a Candida albicans, Sthaphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis y Aspergillus níger.
La validación del proceso de limpieza también se puede dar verificando el cumplimiento de los POES (guías de procedimientos).
Una opción es utilizar un Test de suciedad visible que utiliza un reactivo en polvo que al ser mezclado con agua simula sangre. Otro punto importante es la inspección visual después del lavado.
Para determinados desinfectantes, se comercializan test de pruebas, tiras indicadoras, que determinan la concentración efectiva de ingredientes activos a pesar del uso y diluciones.
